Appliquer les techniques analytiques associées à la production des protéines recombinantes

REF : BIO12

Métiers visés : toute situation professionnelle nécessitant une acculturation aux bases de la production de biomédicaments par le vivant.

 

Présentation

Ce module a pour vocation de faire découvrir ou donner du sens aux contrôles qualité qui encadrent la production des biomédicaments, selon une approche de learning by doing.

 

Objectifs opérationnels

Identifier les techniques analytiques qui seront utilisées tout au long de la fabrication du biomédicament :
– en Upstream process pour vérifier l’identité de la banque cellulaire, sa stérilité et l’absence de mycoplasmes par le laboratoire de contrôle,
– en Downstream process pour contrôler les étapes de purification à l’aide de la spectrophotométrie, des tests LAL…
– en laboratoire de contrôle pour caractériser le produit fini : le doser, vérifier son activité biologique, sa pureté…

Comprendre les résultats obtenus

 

Thèmes abordés

– Les techniques de biologie moléculaire : pour l’identification de la lignée, la recherche de mycoplasmes, la sécurité virale, la titration de vecteur.
– Les techniques microbiologiques pour tester la stérilité, quantifier la concentration en endotoxines.
– Les techniques biochimiques pour caractériser le biomédicament : cytométrie en flux, ELISA, spectrophotométrie, HPLC, Electrophorèse capillaire et SDS-PAGE.

 

Mises en situation (2 jours)

– A partir d’un surnageant de culture cellulaire, vérifier la stérilité et l’absence de mycoplasme.
– A partir d’un anticorps monoclonal purifié, mesurer la concentration protéique par différentes méthodes spectrophotométriques selon la Pharmacopée, vérifier sa pureté par HPLC, SDS-PAGE pour comparer les résultats obtenus et contrôler son activité biologique à l’aide d’un test type ELISA.

 

Modalités d’évaluation

QCM

 

VERSION 2023