S'approprier et mettre en œuvre un procédé DownStream Process

REF : BIO11

 

Métiers visés : toute situation professionnelle nécessitant une acculturation aux bases de la production de biomédicaments par le vivant.

 

Présentation

Ce module s’inscrit dans notre parcours d’acculturation aux biomédicaments et au biomanufacturing. Il introduit le DownStream Process selon une approche de learning by doing.

 

Objectifs opérationnels

– Identifier les étapes de récolte et clarification du milieu de culture, le rôle de chaque étape (ce que l’on cherche à éliminer), les équipements, paramètres critiques et IPC associés.
– Comprendre le principe des différents types de chromatographie utilisés en bioproduction industrielle.
– Savoir expliquer un chromatogramme type.
– Comprendre les choix d’enchaînement des différentes techniques de chromatographie dans un procédé de purification.
– Identifier, au niveau des paramètres process et des opérations de package, les paramètres critiques pour la qualité du produit.
– Identifier les différents types de filtration mis en œuvre dans un process anticorps (Filtration en profondeur, filtration membranaire, ultrafiltration / diafiltration, nanofiltration), en expliquer le principe, et le rôle dans le process de purification.
– Savoir expliquer le principe de l’ultrafiltration tangentielle (TFF) et son rôle dans le procédé de purification.
– Comprendre la différence entre la phase de concentration et la phase de diafiltration, et identifier les paramètres process associés.
– Identifier les techniques d’inactivation virale et d’élimination virale, et leur efficacité en fonction du type de virus.
– Comprendre leur positionnement dans l’enchaînement des étapes process.
– Intégrer la notion d’étapes contributrices.

 

Thèmes abordés

Récolte : cas des molécules intracellulaires, cas des molécules libérées dans le milieu de culture.

Centrifugation
Principe, équipements, paramètres process, que sépare-t-on, qu’élimine-t-on ?
Les agents floculants
Cas de la centrifugation et fractionnement plasmatique

Filtration en profondeur : principe, équipements, paramètres process, que sépare-t-on, qu’élimine-t-on ?

Filtration membranaire : principe, équipements, paramètres process, que sépare-t-on, qu’élimine-t-on ?
Filtration stérilisante ou maîtrise du bioburden ?
Intégrité des filtres.

Généralités sur les techniques de chromatographie et leur utilisation industrielle pour la purification des produits issus des biotechnologies.

Affinité / Echange d’ions / Interactions hydrophobes – principe, matériel, enchaînement des étapes, analyse de chromatogrammes, paramètres critiques.

Le package des colonnes, un élément clé de la reproductibilité des runs de chromatographie.

Runs de purification d’un anticorps.

Généralités sur l’ultrafiltration tangentielle et son utilisation industrielle pour la purification des produits issus des biotechnologies.

L’UF/DF : enchaînement des étapes, paramètres critiques.

Performance et intégrité des filtres de TFF.

Virus nus / virus enveloppés.

Echelle de grandeur différentes familles de virus et substances actives.

Les principales techniques d’inactivation virale.

La nanofiltration, opération et intégrité des filtres.

Les étapes du process contributives.

Exemple d’un schéma intégré de sécurisation virale :

Annexe 14 des BPF et sécurisation virale des dérivés plasmatiques.

Sécurité virale des intrants.

Le cas des Agents Transmissibles Non Conventionnels.

 

Mises en situation (2 jours)

– Run de chromatographie protéine A et/ou échange d’ions et/ou interactions hydrophobes.
– Run de concentration et diafiltration.
– Découverte des autres équipements DSP.

 

Modalités d’évaluation

QCM

 

VERSION 2023